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小动物活体荧光/发光成像
📝 服务介绍
活体成像利用荧光素酶报告基因或荧光探针标记细胞/药物/纳米材料，在小动物体内实时动态监测肿瘤生长、转移、药物分布等生物学过程，无需处死即可获取时间动态信息。
🔬 实验原理
活体成像原理：利用荧光素酶(Luciferase)报告基因或荧光探针标记肿瘤细胞/纳米药物/免疫细胞，注射底物(荧光素)后在活体成像系统中检测光信号，实现无创、实时、定量的肿瘤生长/转移/药物分布监测。
📋 应用领域
- 肿瘤生长与转移活体监测
- 荧光素酶/荧光标记细胞体内示踪
- 药物分布与靶向性活体评价
- 基因表达时空活体追踪
- 纳米材料体内代谢与富集
- 免疫治疗疗效的动态可视化
⭐ 服务优势
- 实时动态：同一动物多时间点监测
- 高灵敏度：可检测数百细胞信号
- 非侵入：无需处死保持完整性
- 多通道：荧光多色同时检测
🔄 服务流程
- 标记细胞/药物/探针（荧光素酶/荧光染料）
- 动物麻醉（异氟烷气体麻醉）
- 底物注射（D-luciferin 150mg/kg 腹腔）或激发荧光
- 活体成像系统采集（曝光1-300s）
- 图像分析：ROI定量荧光强度
- 多时间点动态监测
📋 服务详情 / 客户提供
| 项目 | 要求 |
|---|---|
| 标记方式 | 荧光素酶报告基因/荧光探针/荧光染料 |
| 检测目的 | 肿瘤生长/转移/药物分布/炎症 |
| 动物品系 | BALB/c-nu（荧光成像需白化小鼠） |
| 时间节点 | 指定监测时间点 |
| 对照组 | 未标记对照/溶媒对照 |
📊 结果展示
活体成像图片（荧光/发光信号叠加于动物体表图）、ROI荧光强度统计图、动态生长曲线及实验报告。
📦 最终交付
活体成像图片（荧光/发光信号叠加于动物体表图）、ROI荧光强度统计图、动态生长曲线及实验报告。
Q: 活体成像荧光信号本底高怎么办
裸鼠仍有自身荧光（毛发/皮肤/食物）。使用近红外探针（如Cy7/iCG）降低背景；脱毛处理；禁食12h减少食物荧光干扰；选择荧光素酶发光系统避免自发荧光。
Q: 腹腔注射D-luciferin后多久成像
一般10-15min后信号达到峰值。建议先做时间梯度预实验（5/10/15/20/30min）确定峰值时间，后续固定在峰值时间成像。
Q: 荧光素酶和荧光蛋白怎么选
荧光素酶(Luc)：需底物(荧光素)催化发光，穿透深(1-2cm)、背景低但需注射底物。荧光蛋白(GFP/RFP/iRFP)：直接荧光激发，无需底物但激发光穿透浅(<1mm)、自发荧光高。深部肿瘤用Luc，浅表用荧光蛋白。iRFP(近红外)穿透更深。
Q: IVIS活体成像注意事项
1)底物剂量：D-Luciferin 150mg/kg i.p. 10-15min后成像；2)麻醉：异氟烷1.5-2.5%或注射麻醉；3)曝光时间：1-60s自动曝光避免过曝；4)温度：37°C保温台；5)脱毛：脱毛膏/剃毛去除毛发(干扰信号)；6)对照组设未标记细胞本底。
Q: 如何定量IVIS信号
ROI(感兴趣区域)框选信号区域，测量总光子数(photons/s)。背景ROI测量本底。校正后信号=总信号-背景。比较组间定量用ROI总光子数。绘制时间-信号曲线反映肿瘤生长动态。需统一曝光参数(曝光时间/光圈/ISO)确保可比。
Q: IVIS能检测多少细胞
荧光素酶标记的细胞在皮下可检测到10³-10⁴细胞(取决于Luciferase表达量和位置)。深部器官(肝/肺)灵敏度低约10⁵。转移灶检测需≥10⁵细胞。灵敏度受细胞Luc表达量、底物剂量、曝光时间和部位深度影响。建议做体外标准曲线确定检出限。
Q: 活体成像如何追踪药物分布
荧光/荧光素酶标记纳米药物/抗体/细胞，注射后不同时间点成像，绘制药物分布-时间曲线。IV成像需近红外染料(Cy5.5/Cy7/iRFP穿透深)。组织离体成像验证器官分布。药代动力学：定量各时间点各器官信号强度绘制PK曲线。