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肝/胆管类器官培养
📝 服务介绍
肝脏类器官从肝组织或胆管中分离肝干细胞/胆管细胞，在3D培养体系中形成具有肝细胞和胆管细胞特征的类器官，可用于药物肝毒性评价、肝病建模和肝再生研究。
🔬 实验原理
肝脏类器官原理：肝组织/Lgr5⁺细胞/iPSC来源细胞在Matrigel中3D培养，加入Wnt/R-spondin/Noggin/HGF/EGF/FGF等因子后形成肝小管结构，表达肝细胞标志物(ALB/A1AT)和胆管标志物(CK19/SOX9)，用于肝脏疾病建模和药物肝毒性评价。
📋 应用领域
- 肝脏类器官构建（肝细胞/胆管细胞）
- 肝毒性药物筛选与风险评估
- 肝炎病毒（HBV/HCV）感染研究
- 肝脏再生与干细胞分化研究
- 代谢性疾病肝类器官模型
- 药物肝代谢与解毒功能研究
⭐ 服务优势
- 肝毒性评价：比2D肝细胞更持久
- 多细胞类型：肝细胞/胆管细胞
- 可传代：克服原代肝细胞不可传代问题
- 疾病建模：肝硬化/肝癌/遗传性肝病
🔄 服务流程
- 肝组织取样消化分离细胞
- 离心收集肝实质/胆管细胞
- Matrigel包埋接种
- 加入肝脏类器官培养基（HCM+Wnt/R-spondin/Noggin/Forskolin）
- 培养7-14天形成类器官
- 传代扩增或分化培养
📋 服务详情 / 客户提供
| 项目 | 要求 |
|---|---|
| 组织来源 | 小鼠肝/人手术肝标本/胆管 |
| 类器官类型 | 肝实质类器官/胆管类器官 |
| 用途 | 肝毒性/肝病建模/药物代谢 |
| 分化需求 | 是否需要分化为成熟肝细胞 |
📊 结果展示
肝脏类器官（培养中/冻存管）、明场图片、ALB/CK19等标志物IF鉴定及实验报告。
📦 最终交付
肝脏类器官（培养中/冻存管）、明场图片、ALB/CK19等标志物IF鉴定及实验报告。
Q: 肝脏类器官分化功能不成熟怎么办
添加分化培养基（撤除Wnt3A/R-spondin/Noggin，添加HGF/OSM/Dex），培养7-10天诱导分化。检测白蛋白分泌、CYP3A4活性和尿素合成确认功能成熟。
Q: 原代肝细胞培养不贴壁如何利用类器官
原代肝细胞可直接包埋Matrigel形成类器官样聚集体（hepatosphere），或与胆管细胞共培养形成肝-胆管类器官。比2D培养存活时间更长（>2周 vs 3-5天）。
Q: 肝脏类器官和原代肝细胞区别
原代肝细胞：2D培养3-5天即失去功能(去分化)，不能传代，但短期代谢功能好(CYP酶高)。肝脏类器官：3D培养可长期传代(>6个月)保留肝功能(白蛋白分泌/CYP活性)，但CYP表达可能低于原代。药物代谢研究选原代肝细胞(短期)，长期毒性/疾病建模选类器官。
Q: 肝脏类器官培养基配方
Advanced DMEM/F12+B27+N2+HGF(25ng/mL)+EGF(50ng/mL)+FGF10(50ng/mL)+R-spondin1(500ng/mL)+Noggin(100ng/mL)+Wnt3a conditioned medium(50%)+CHIR99021(3μM)+Y-27632(10μM传代加)+Gastrin(10nM)+Nicotinamide(10mM)+A83-01(0.5μM)。成熟培养需撤Wnt加HGF/BMP。
Q: 肝脏类器官能检测什么功能
1)白蛋白分泌(ELISA/免疫荧光)；2)CYP酶活性(药物代谢探针)；3)尿素合成；4)胆汁酸代谢；5)糖原储存(PAS染色)；6)药物肝毒性评价(CCK-8+AST/ALT)；7)乙肝/丙肝病毒感染(NTCP受体)；8)遗传性肝病(Wilson病/α1抗胰蛋白酶缺乏症)建模。
Q: 肝脏类器官多久成熟
肝脏类器官在增殖培养基(含Wnt/R-spondin)中生长增殖，需换至分化培养基(撤Wnt加HGF/BMP/地塞米松/Oncostatin M)培养7-14天使类器官成熟(表达CYP/白蛋白)。未分化类器官干性标志物高(Lgr5/SOX9)，成熟类器官肝功能高(ALB/CYP3A4)。药物毒性评价需先成熟。