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三维球体培养与检测
📝 服务介绍
3D细胞球体培养利用低附着板使细胞自发聚集形成三维球体结构，更真实模拟体内肿瘤微环境，用于药物渗透、放射抗性等研究，是连接2D细胞实验与动物实验的桥梁模型。
🔬 实验原理
3D细胞球体原理：细胞在低吸附/悬滴/超低吸附板/微载体中自组装形成三维球体，模拟体内三维微环境(细胞-细胞/细胞-基质互作)，比2D培养更接近体内生理状态，用于药物筛选、肿瘤研究和组织工程。
📋 应用领域
- 3D细胞球培养与肿瘤微环境模拟
- 类球体药物渗透/敏感性评价
- 3D培养中细胞极性/分化研究
- 肿瘤干细胞球形成评估
- 3D模型下侵袭与转移行为研究
- 类器官-3D共培养前期模型
⭐ 服务优势
- 三维结构：模拟体内微环境与药物渗透屏障
- 高临床相关：药敏结果比2D更接近体内
- 可成像：支持明场/荧光/共聚焦成像
- 可组合：共培养多细胞类型球体
🔄 服务流程
- 细胞消化计数，接种低附着板（96孔U底）
- 离心促聚（200g 5min）或自然沉降
- 培养3-7天至球体形成
- 加药处理（不同浓度梯度）
- ATP检测（CellTiter-Glo 3D）或活死染色
- 成像与数据分析
📋 服务详情 / 客户提供
| 项目 | 要求 |
|---|---|
| 细胞系 | 指定细胞系名称及成球能力评估 |
| 处理条件 | 药物/照射方案及对照 |
| 检测方式 | 活力检测/活死荧光染色/切片成像 |
| 培养时间 | 3-7天形成球体可延长至14天 |
📊 结果展示
球体明场/荧光图片、活力数据统计图、球体大小测量数据及实验报告。
📦 最终交付
球体明场/荧光图片、活力数据统计图、球体大小测量数据及实验报告。
Q: 球体大小不均匀怎么改善
使用低附着U底96孔板+离心促聚法（200g离心5min），确保每孔接种相同细胞数。培养前3天不换液之后隔天半量换液。
Q: 3D球体药敏结果与2D差异大正常吗
完全正常。3D球体存在药物渗透屏障和细胞异质性，对化疗药通常表现出更强抗性（IC50升高2-10倍）。
Q: 3D球体怎么做
1)超低吸附板(ULA 96孔圆底)：每孔1-5×10^3细胞200μL→离心300g 5min→37°C 3-7天自组装成球；2)悬滴法：20μL滴20-50μL/滴→倒置培养→3-5天成球→转移至板；3)微载体/水凝胶：Matrigel/海藻酸钠/PEG水凝胶中培养。ULA板最简便(96孔板高通量)。球体大小200-500μm。
Q: 3D球体和2D培养区别
3D球体：3D结构模拟体内(细胞-细胞互作/氧气和营养梯度/增殖和凋亡区域)，更接近体内药敏，但培养难/成像难/通量低。2D：均一高通量但失去空间结构/梯度/异质性。药物初筛选2D(高通量)，药效验证选3D(更生理)。肿瘤药敏选3D(更接近体内耐药)。
Q: 3D球体药敏怎么做
1)ULA 96孔板铺细胞5000/孔→3-5天成球→加药物浓度梯度(0.01-100μM)处理3-5天；2)活力检测：CellTiter-Glo 3D(ATP定量，最适合3D)或CCK-8(穿透3D差需延长孵育)或活死染色(Calcein AM/EthD-1)；3)GraphPad拟合IC50。每组≥3复孔。3D球体IC50通常高于2D(3D耐药)。
Q: 3D球体大小怎么控制
1)细胞密度(500-10000/孔决定球体大小)；2)培养时间(3-7天逐渐增大)；3)细胞类型(高粘附细胞成球快)；4)培养基/血清浓度影响增殖。建议500-1000细胞/孔培养3-5天形成200-500μm球体(>500μm中心坏死)。用共聚焦/光片显微镜3D成像(需透明化处理)。
Q: 3D球体能做什么研究
1)肿瘤药敏(更接近体内IC50)；2)细胞迁移/侵袭(混合基质胶铺底)；3)肿瘤微环境(球体-成纤维/免疫共培养)；4)血管生成(球体+内皮细胞出芽)；5)辐射抵抗(3D比2D更抗辐射)；6)类器官(高级3D模型)。3D球体是2D和类器官之间的中间模型。