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EdU细胞增殖检测
📝 服务介绍
EdU是一种胸腺嘧啶类似物，在DNA合成期掺入新合成的DNA，通过Click化学反应与荧光探针偶联，直接检测细胞增殖状态。相比BrdU无需变性DNA，操作更简便且灵敏度更高。
🔬 实验原理
EdU检测原理：EdU(5-乙炔基-2'-脱氧尿苷)是胸苷类似物，在DNA合成期(S期)掺入新生DNA。EdU的炔基通过点击化学(Click Chemistry)与荧光偶联的叠氮物共价连接，不需抗体即可直接检测细胞增殖，比BrdU更简便快速。
📋 应用领域
- 细胞增殖率定量检测
- S期DNA合成活性评估
- 药物/基因干预对增殖的影响
- 干细胞增殖与分化研究
- 肿瘤细胞增殖标志物评价
- 体内增殖标记（组织EdU检测）
⭐ 服务优势
- 无需DNA变性：比BrdU更温和
- 高灵敏度：Click反应荧光信号强
- 兼容多重染色：可与DAPI等联用
- 可定量：流式或显微成像
🔄 服务流程
- 细胞接种培养，加入EdU（10uM，2h）
- 固定细胞（4%多聚甲醛15min）
- 通透（0.5% Triton X-100 20min）
- Click反应（EdU-Alexa Fluor 488 30min）
- DAPI染核封片
- 荧光显微镜观察/流式分析
📋 服务详情 / 客户提供
| 项目 | 要求 |
|---|---|
| 细胞系 | 指定细胞系名称及培养条件 |
| 处理条件 | 药物/基因处理方案及时间节点 |
| 检测方式 | 荧光显微/流式/高内涵成像 |
| 对照要求 | 未加EdU阴性对照 |
📊 结果展示
交付EdU荧光图片（含DAPI核染）、EdU阳性率统计柱状图、实验报告。
📦 最终交付
交付EdU荧光图片（含DAPI核染）、EdU阳性率统计柱状图、实验报告。
Q: EdU掺入时间多长合适
一般2-4小时。增殖快的肿瘤细胞2h足够；原代细胞或增殖慢的细胞可延长至4-6h。避免过长（>24h）导致二次掺入。
Q: EdU与BrdU的主要区别
EdU通过Click反应检测，无需变性DNA，细胞形态保持更好、抗体结合更特异。已逐步替代BrdU。
Q: EdU和BrdU区别
EdU：点击化学直接荧光标记，不需DNA变性(无需盐酸/微波处理)，不破坏抗原表位(可同时IF染色)，操作2h快速，灵敏度高。BrdU：需DNA变性(暴露BrdU表位)才能被抗体识别，变性破坏细胞形态和抗原表位，操作6-8h。EdU更简便快速且兼容性好，建议优先选择EdU。
Q: EdU检测怎么操作
1)EdU加入培养基(10μM)孵育2-4h(增殖细胞)或24-48h(体内长周期)；2)4%PFA固定15min；3)0.5%Triton穿透10min；4)Click反应液(荧光叠氮物+Catalyst+缓冲液)室温30min避光；5)DAPI染核5min；6)荧光显微镜/流式检测。不需抗体，全程约2h。EdU阳性=S期细胞。
Q: EdU检测能做什么
1)细胞增殖检测(S期比例=增殖指数)；2)体内增殖检测(腹腔注射EdU→取组织检测)；3)药物对增殖的影响(加药后EdU掺入变化)；4)组织干细胞增殖(肠隐窝/毛囊干细胞)；5)发育生物学(胚胎增殖区域)；6)与IF联染(EdU+标志物抗体同时检测)。EdU兼容所有IF流程。
Q: EdU浓度和孵育时间怎么选
体外细胞：10μM EdU 2h(快速增殖)或10μM 24h(慢增殖/药物处理)。体内：腹腔注射5-10mg/kg EdU，2-24h后取材。EdU浓度过高(>50μM)有细胞毒性。孵育时间过短(<1h)信号弱；过长(>48h)EdU可能稀释。建议预实验确定最佳条件。EdU可多次注射追踪增殖(脉冲-追赶实验)。
Q: EdU结果怎么定量
荧光显微镜：随机5-10视野×200-500细胞/视野→EdU阳性细胞/DAPI总细胞×100%=S期比例。流式：EdU-FITC荧光强度→S期峰。高内涵成像：自动计数EdU+细胞比例。比较各组间增殖指数差异(t检验/ANOVA)。建议每组≥3复孔，每孔≥5视野，计数≥500细胞。