类器官共培养
类器官-免疫/间质共培养
📝 服务介绍
类器官共培养将类器官与免疫细胞、成纤维细胞、内皮细胞或基质细胞共同培养,重建肿瘤微环境中多细胞互作关系,研究免疫治疗、间质-肿瘤互作等复杂生物学过程。
🔬 实验原理
类器官共培养原理:将类器官与免疫细胞/成纤维细胞/内皮细胞/微生物共培养,构建更接近体内微环境的复合模型。共培养可研究细胞间互作、免疫治疗、肿瘤微环境和感染机制。
📋 应用领域
- 类器官-免疫细胞共培养
- 类器官-成纤维细胞/基质细胞互作
- 类器官-微生物(菌群)共培养
- 类器官-血管内皮共培养
- 肿瘤类器官与肿瘤微环境重建
- 共培养体系药物反应评价
⭐ 服务优势
- 微环境重建:保留多细胞互作
- 免疫评价:类器官-免疫细胞共培养
- 个体化:PDO+患者PBMC个体化免疫评价
- 可成像:实时观察细胞互作
🔄 服务流程
- 类器官培养成熟
- 消化为片段或保持完整
- 准备共培养细胞(PBMC/成纤维/内皮)
- 共培养体系建立(Matrigel/液液界面/微流控)
- 加入培养基(含必需因子)
- 培养3-14天观察互作
- IF/活死/流式分析
📋 服务详情 / 客户提供
| 项目 | 要求 |
|---|---|
| 类器官 | 平台构建或客户提供 |
| 共培养细胞 | PBMC/成纤维/内皮/巨噬细胞等 |
| 检测目的 | 免疫杀伤/侵袭/血管化 |
| 培养方式 | Matrigel共包埋/液液界面/Transwell |
📊 结果展示
共培养明场/荧光图片、免疫杀伤率/细胞活力统计、IF鉴定结果及实验报告。
📦 最终交付
共培养明场/荧光图片、免疫杀伤率/细胞活力统计、IF鉴定结果及实验报告。
Q: 类器官-免疫细胞共培养杀伤效率低怎么办
确保效应/靶细胞比足够(10:1-50:1)、使用活化的T细胞(CD3/CD28磁珠活化+IL-2扩增3-5天)、类器官消化为小片段增加接触面积。可加IL-2促进T细胞存活。
Q: 共培养体系如何保持两种细胞活力
使用条件培养基(类器官培养基+免疫细胞培养基1:1混合)、添加必需生长因子、及时换液(隔天半量换液)、3-5天内完成评价避免过度生长。
Q: 类器官和免疫细胞共培养怎么做
1)消化类器官为单细胞/小簇→接种96孔板;2)加外周血PBMC或T细胞(效应:靶=5-10:1);3)加IL-2(10ng/mL)维持T细胞;4)共培养48-72h检测。方法:ALTS类器官-免疫共培养(肿瘤类器官+自体T细胞)。肿瘤杀伤评估:活死染色/ImageXpress高内涵或LDH释放。
Q: 类器官共培养和2D共培养区别
类器官共培养:保留3D空间结构/细胞间连接/基质,更接近体内但操作复杂、成像难。2D共培养:均一、高通量、易成像但失去空间组织。研究免疫杀伤选2D(定量好),研究空间互作/屏障功能选类器官(生理性好)。建议两者配合使用。
Q: 类器官和成纤维细胞共培养
将类器官与肿瘤相关成纤维细胞(CAF)共培养可研究肿瘤-间质互作。方法:1)Matrigel dome中混合类器官细胞+CAF(3:1);2)或Transwell下室加CAF上室类器官(间接共培养);3)或CAF条件培养基培养类器官。评估:增殖(Ki67)、侵袭(胶原凝胶)、EMT标志物(E-cad/Vimentin)、信号通路激活。
Q: 类器官和微生物共培养怎么做
肠道类器官:1)微注射:将细菌注入类器官腔内(需显微操作);2)顶端暴露:反转类器官(apical-out)后加细菌;3)条件培养基:细菌培养上清加至类器官。评估:屏障完整性(TEER/紧密连接蛋白IF)、炎症因子(IL-8/TNF)、组织损伤(HE/活死染色)。安全:BSL-2操作。
Q: 类器官和内皮细胞共培养
将类器官与血管内皮细胞(HUVEC)共培养可研究血管化和药物渗透。方法:1)Matrigel中共培养(内皮细胞自组装成管);2)微流控芯片中类器官-血管网络;3)类器官中注射iPSC来源内皮前体细胞。评估:CD31/VEGF IHC、血管灌注(荧光葡聚糖)、药物渗透性。高级模型加入周细胞。